Контроль микробиологического состояния книгохранилищ

Сохранность материалов в значительной степени зависит от чисто­ты воздуха книгохранилищ. Загрязнение воздуха спорами микроорга­низмов и пылью определяет экологическое состояние помещения и считается одним из основных факторов, влияющих на повреждение документов.

Согласно классическому определению экологический монито­ринг — это информационная система наблюдений, оценки и прогноза изменений в состоянии окружающей среды. Экологический монито­ринг является одним из способов получения экологической информа­ции, его результаты предназначены для принятия решений.

Экологический мониторинг в условиях библиотек и архивов пре­дусматривает периодический анализ санитарно-гигиенического со­стояния воздуха хранилищ и поверхности документов, коробок, папок, стен, стеллажей, полок в целях определения возможного биологи­ческого заражения, а также постоянный контроль климатических ус­ловий.

При наличии в помещениях зон, в которых санитарно-гигие­нические показатели неудовлетворительны, необходимо принимать направленные на улучшение состояния помещений меры, преду­смотренные ГОСТ 7.50-2002 (проветривание, обеспыливание). В слу­чае поражения библиотечных фондов грибами очень важно опреде­лить причины заражения, разработать меры по их устранению и оце­нить эффективность этих мер.

Санитарно-гигиеническое состояние воздушной среды, кроме за­пыленности, характеризуется количеством микроорганизмов и при­надлежностью их к определенному виду. Микроорганизмы попадают в хранилище вместе с внесенными предметами, поступают с воз­душными потоками через вентиляционные системы и во время про­ветривания.

В условиях нестабильности влажности и температуры воздуха по­мещения, несоответствия его состояния установленным нормам, за­грязнения воздуха и поверхностей пылью спровоцированный рост грибов неизбежен, что приводит к повреждению документов, а также угрожает здоровью людей.

Если в воздухе помещения, где хранятся документы, относитель­ная влажность более 60 %, и влагосодержание документов превышает 8—10 %, возникает реальная опасность развития микроорганизмов. В помещениях с сухим воздухом микроорганизмы представляют со­бой лишь потенциальные источники биоповреждения до того момен­та, пока не возникают условия для развития спор. Это может произой­ти через несколько дней, месяцев или даже лет. Чтобы оценить ту роль, которую микрофлора может играть в процессе биологического повре­ждения книг, очень важно знать, насколько долго могут сохранять жиз­неспособность споры грибов, присутствующие в воздухе, на гигроско­пических материалах (бумага, кожа, пергамен) и на поверхностях стеллажей, полок, витрин (дерево, металл, стекло), а также какие фак­торы влияют на их жизнеспособность.

Локальные образования колоний грибов появляются прежде всего в местах с пониженной скоростью обмена воздуха, повышенном уровне влажности и запыленности. В зонах, где воздухообмен не осу­ществляется, активно развиваются грибы-биодеструкторы. Присутст­вие их в воздухе обусловлено пассивным рассеиванием спор потоками воздуха. Поэтому концентрация спор в воздухе помещений также в значительной мере зависит от интенсивности воздушных потоков.

В библиотеках ряда стран в течение уже нескольких десятилетий исследуют микрофлору в целях выявления возбудителей биологиче­ского повреждения материалов, из которых состоят документы, и фак­торов, способствующих развитию микроорганизмов. В Российской национальной библиотеке микробиологический мониторинг прово­дится ежемесячно с» » >HTML-комментарий2000 г.

Для определения количества микроорганизмов в воздухе храни­лищ, в пыли и на поверхностях документов используют различные ме­тоды. Микробиологический анализ воздушной среды в ФЦКБФ РНБ осуществляется путем отбора проб воздуха на питательные среды дву­мя методами: седиментационным и аспирационным (рис. 1).

Седиментационный метод применяется для анализа воздуха поме­щений и является наиболее простым, доступным, недорогим, так как не требует применения специальных приборов. Однако этим методом не­возможно определить количество микроорганизмов в определенном объеме воздуха. Метод седиментации основан на осаждении микроор­ганизмов на поверхность твердой питательной среды из столба воздуха над чашкой Петри диаметром 90 или100 ммв течение определенного времени. Для этого открытые чашки Петри со стерильной агаризованной питательной средой расставляют по принципу конверта (рис. 2) для того, чтобы определить количество микроорганизмов в местах с разным воздухообменом. Продолжительность оседания 10, 30 или 60 мин. В ФЦКБФ чашки принято выдерживать в книгохранилищах 60 мин, что позволяет сравнивать результаты, получаемые в других библиотеках.

В качестве твердой питательной среды для исследования воздуха книгохранилищ используют среду Чапека-Докса, пригодную для роста грибов. Среда Чапека-Докса представляет собой систему, кото­рая включает глюкозу, набор солей, необходимых для роста микроор­ганизмов, и агар-агара, который придает среде твердость. При необхо­димости определения общего количества микроорганизмов дополни­тельно применяют сухой питательный, мясо-пептонный агар или сусло-агар.

Скорость пассивного осаждения из столба воздуха зависит от мас­сы спор или фрагментов микроорганизмов, составляющих микро­флору. Крупные споры и частицы мицелия быстрее оседают на по­верхность среды, чем более мелкие. Их масса увеличивается при воз­растании относительной влажности воздуха, и осаждение происходит еще быстрее.

Микроорганизмы оседают на чашку Петри не только непосредст­венно из столба воздуха, но и заносятся воздушными потоками из дру­гих слоев, содержание микроорганизмов в которых носит вероятност­ный характер. В этом случае методом седиментации могут быть полу­чены завышенные данные.

Значительное влияние на результаты седиментационного метода оказывает и броуновское (хаотичное) движение микроорганизмов в воздухе. Воздушные потоки уносят с собой споры и мицелий с зара­женных предметов и способствуют образованию биологических аэро­золей, длительное время циркулирующих в воздухе помещения. При этом концентрация микроорганизмов в воздухе больше в 2—3 раза по сравнению с полученными результатами, так как при седиментацион- ном методе мелкие споры аэрозольного фона, как правило, не успева­ют оседать на чашку.

Поэтому более точно количество жизнеспособных микроорганиз­мов в воздухе можно определить только аспирационными методами. Использование устройств для взятия проб воздуха позволяет опреде­лить количество КОЕ в1 м³. Действие аспирационных приборов мо­жет быть основано на импактном или фильтрационном методе.

Импактный метод — это принудительное осаждение микроорга­низмов из воздуха на поверхность твердой питательной среды с ис­пользованием пробоотборников различной конструкции. В РНБ ис­пользуют приборы фирмыHi-Media(Индия), действие которых осно­вано на принудительном осаждении микроорганизмов из воздуха на чашки Петри или стрипы (пластинки с ячейками для питательной сре­ды), а также воздухоотборник ПУ-1Б («Химко», Россия).

Чашки Петри или стрипы со средой открывают и помещают в при­бор, задают время отбора пробы, которое соответствует определен­ному объему воздуха (от 100 до1000 л) для прибораHi-Media,или объ­ем отбираемой пробы для прибора ПУ-1Б. При включении устройства центробежный вентилятор просасывает пробу воздуха из атмосферы через многосопловую решетку прибора, при этом микроорганизмы, содержащиеся в воздухе, задерживаются на твердой питательной среде (рис. 3). Чашки или стрипы выдерживают в термостате при температуре 28 °С через 5—7 сут и подсчитывают количество микро­организмов.

Фильтрационный метод основан на прокачивании воздуха через фильтры, диаметр пор которых должен быть меньше, чем клетки мик­роорганизмов. Диаметр спор грибов составляет от 2 до 20 мкм, и при диаметре пор фильтра меньше 1 мкм практически все клетки остаются на фильтре.

В РНБ с этой целью использовали для забора воздуха аспиратор НПО «Красногвардеец» (модель 822). Аспиратор присоединяли к колбе Бунзена, снабженной насадкой из нержавеющей стали (фир­мыSartorius,Германия). В насадку помещали стерильные фильтры фирмыSartoriusс диаметром порd=»0,65мкм. Затем фильтры перено­сили на чашку Петри с питательной средой и инкубировали в термо­стате при 28 °С. Количество микроорганизмов в1 м³рассчитывали по формуле (1).

Условно принято, что помещение находится в удовлетворительном состоянии, если число колоний, выросших на чашке после экспози­ции, не превышает десяти колоний за один час экспозиции, получен­ное аспирационными методами — до 300—500 КОЕ/ м³за время отбо­ра пробы (для библиотечных помещений данный показатель находит­ся на стадии разработки).

Для качественного и количественного определения микроорганиз­мов на поверхности можно использовать несколько способов отбора проб:

 

• с помощью стерильных ватных тампонов;
• отпечатками на влажные стерильные диски фильтровальной бумаги;
• бактериальными печатками с твердой питательной средой;
• соскобом поврежденных материалов (в основном со стен, стел­лажей и пола помещений).

 

При необходимости выполнить только качественный анализ, а именно определить наличие жизнеспособных микроорганизмов на поверхности документа, достаточно снять пробу тампоном и перене­сти содержимое тампона на поверхность твердой питательной среды в чашках Петри. Интенсивность, скорость роста и видовой состав вы­росших микроорганизмов позволят определить, имеет ли место про­цесс биодеструкции или документ сильно загрязнен.

Для более точной и полной оценки количества жизнеспособных микроорганизмов на поверхности используют метод последователь­ных разведений. С помощью стерильных хлопковых тампонов (луч­ше влажных) снимают слой загрязнений с заданной площади поверх­ности. Тампон помещают в колбу или пробирку со стерильной водой. Далее делают несколько последовательных разведений в стерильной воде и стерильной пипеткои на поверхность твердой питательной среды наносят определенное количество полученной взвеси из каж­дого разведения. Через 5—7 сут подсчитывают количество вырос­ших колоний и рассчитывают количество микроорганизмов на по­верхности по формуле.

Для определения количества микроорганизмов на документах ис­пользуют стерильные диски фильтровальной бумаги, увлажненные стерильной водой. При этом документу не наносится никакого вреда. Диск с помощью стерильного пинцета прижимают к поверхности исследуемого документа, а затем переносят на твердую поверхность питательной среды Чапека-Докса в чашках Петри. Через 30 мин диск убирают, и чашки помещают в термостат при температуре 28 °С на 5—7 сут.

Концентрацию живых микроорганизмов на поверхности рассчи­тывают по формуле:

C = KV/SVь

где:

С — концентрация микроорганизмов на поверхности, КОЕ/дм²;

К — количество выросших колоний, КОЕ;

V — конечный объем воды всех последовательных разведений; К (опре­деляют из последнего разведения);

S — площадь, с которой отобрана проба, дм²;

V\ — объем суспензии для анализа, мл.

Количество жизнеспособных спор микроорганизмов в навеске об­разцов пыли и поврежденных материалов (штукатурка, дерево и пр.), полученных соскобом, определяют методом разведений и рассчитыва­ют содержание КОЕ в1 гматериала.

Бакпечатки прикладывают поверхностью питательной среды (рис. 5), закрывают и помещают в термостат при 28 °С на 5—7 сут.

Количество выросших колоний пересчитывают в КОЕ/ дм². Однако следует иметь в виду, что использование бакпечаток для определения зараженности документов нежелательно, поскольку они могут остав­лять следы питательной среды на поверхности бумаги.

На основе многочисленных анализов, проводимых в РНБ, приня­то считать, что количество микроорганизмов на горизонтальной по­верхности не должно превышать 50 КОЕ/ дм², на вертикальной — 25 КОЕ/ дм².

Особенно важно, кроме количественных характеристик, опреде­лить видовой состав микроорганизмов, выделенных тем или иным ме­тодом, для того чтобы выявить их потенциальную опасность для биб­лиотечных материалов.

Список использованной литературы

Израэль Ю. А. Экология и контроль состояния природной среды. М. : Гидро- метеоиздат, 1984. 560 с.

Мантуровская Н. В. Микологическое состояние книгохранилищ // Теория и практика сохранения памятников культуры : сб. науч. тр. / РНБ. 1995. Вып. 17. С. 23—27.

Планирование действий на случай бедствия в вашей библиотеке : метод, руко­водство / сост. С. А. Добрусина, Е. С. Чернина, Т. Д. Великова, В. И. Кобя- кова ; РНБ. СПб., 2000. 32 с.

Температурно-волопсний режим та мжобюта повггряapxieiB iмузейних примщень / В. Довгалюк, Т. Кондратюк, О. Рибчинська, О.

Рясна // Оргашзащя збершанняiзабезпечення збереженост1 кшовщеофотофоно- докуменпв у ЦДКФФА УкрашиiMemГ. С. Пненичного // Ступ зapxiBHOÏсправи та документознавства. Киев, 2000. Т. 6. С. 103—106.

Техническое описание и инструкция по эксплуатации ЕВКН 4. 471. 014 ТО к устройству пробоотборному электрическому ПУ-1Б(дата выпуска 6 нояб­ря2002 г.).

Pingaud N, LeclercВ.,BrandtA. Suivi la biocontamination de l’air dans les magasins de la bibliothèque nationale//Environnement et Conservation de l’écrit,

de l’image et du son : actes des 2^ejournées internationales de l’ARSAG, 16—20 mai 1994,Paris. Paris, 1994. P. 72—78.

Recherches sur quelques facteurs clés dans la détérioration biologique des livres et des documents/F.Gallo,C. Marconi, P.Valenti,P. Colaizzi, C. Pasqueriello, M. Scorrano, O. Maggi, F.M. Persiani//Environnement et conservation de l’écrit, de l’image et du son : actes des 2 journées internationales de l’ARSAG, 16—20 mai 1994, Paris. Paris, 1994. P. 63—71.

Е. А. Попихина